近日，一例患儿创造了历史，他成为第一个接受定制化体内CRISPR基因编辑疗法治疗的患者。

       患儿名为KJ，去年8月初出生时即被诊断为氨基甲酰磷酸合成酶1（CPS1）缺乏症，这是一种罕见的常染色体隐性遗传代谢疾病。CPS1基因突变导致患者无法正常代谢蛋白质分解产生的含氮废物（如氨），从而引发高血氨症，严重损害大脑功能。早发型的CPS1缺乏症病死率极高，病情进展迅速。

       此类患者需依赖严格的低蛋白饮食、氮清除剂及可能的肝移植，但肝移植等待时间长、风险高，且无法根治。

       而基因治疗扭转了这一命运。KJ现在已经10个月大，已能独坐、挥手、翻身，他即将首次回家与三个哥哥姐姐团聚。

       这是全球首例针对个体患者特定基因突变定制的CRISPR疗法，从基因测序、疗法设计到临床审批仅耗时6个月，相关成果最近发表在了NEJM上。

明星班底提供定制基因编辑治疗

       实际上，KJ出生不到48小时就已经出现了嗜睡、呼吸窘迫，血氨>1000 μmol/L（正常9-33 μmol/L）等症状。好在医生及时认出了该疾病。

       母亲Nicole Muldoon坦言：“若非医生及时识别异常，他可能活不过第五天。”

       标准处理显然治标不治本，患者的状况在与事件赛跑，在这种情况下，负责患儿的医生费城儿童医院（CHOP）代谢病专家Rebecca Ahrens-Nicklas几天后联系了基因治疗先驱Kiran Musunuru（Verve Therapeutics联合创始人）寻求帮助。

       在这一背景下，一个跨学科，跨越多家技术公司的团队成立了。

       此次研究由NIH直接资助，Acuitas Therapeutics提供LNP技术、Integrated DNA Technologies提供gRNA合成、Aldevron负责mRNA生产。

       时间确实不等人。

       患儿经连续肾脏替代治疗（CRRT）稳定后，依赖氮清除剂（苯丁酸甘油酯）、瓜氨酸补充及维持严格低蛋白饮食来稳定病情。

       通过标准治疗，患儿在出生50-100天后经历短暂的稳定期，然而此后，血氨与谷氨酰胺水平再次升高，需进一步限制蛋白质摄入并增加药物剂量，这使得患儿最终在5月龄被列入肝移植名单。

       留给团队的时间不多了。

治疗与研究历程

       尽管KJ携带Q335X（父源）与E714X（母源）双突变，研究团队聚焦于其中更为关键的Q335X，修复Q335X突变后代谢获益更加明显。

       由于无法直接获得患儿肝细胞，研究团队使用HuH-7细胞系构建携带CPS1 Q335X突变的体外模型，通过慢病毒载体将突变序列插入基因组，筛选最优碱基编辑器。

       研究人员从多种腺嘌呤碱基编辑器（ABE）中选定NGC-ABE8e-V106W，其能够引导RNA（gRNA“kayjayguran”）靶向Q335X突变的第8位腺嘌呤，虽存在邻近腺嘌呤的“旁观者编辑”，但均为同义突变（同义突变不会改变蛋白质序列）。递送系统则采用的LNP-mRNA技术。

       研究人员随后在小鼠和非人灵长类（食蟹猴）中进行了安全性及有效性验证。碱基编辑效率最高达实现了42%肝细胞修复。食蟹猴单剂量毒性试验显示，1.5 mg/kg RNA剂量的脂质纳米颗粒（LNP）仅引起短暂肝酶升高（ALT/AST），无其他毒性，支持人体低剂量（0.1 mg/kg）的安全性。

       在随后的IND审查中，研究直接通过FDA的单患者扩大使用IND（研究性新药）申请获批，从提交到批准仅1周。

       而伦理审查由CHOP机构审查委员会（IRB）通过替代程序加速完成，患儿父母签署书面知情同意。

       具体注输方式采用了“低剂量启动”+“逐级递增”的模式。

       在出生后第208天（也就是患儿被列入肝移植名单一个月后），患儿接受了首次注输，首次注输联合了免疫抑制剂（西罗莫司和他克莫司）来预防针对CPS1蛋白的免疫反应。治疗后蛋白质耐受性改善，但未能完全停用氮清除剂。

       22天后的第二次注输，注输剂量提升，患儿血氨中位数从首次治疗前的23 μmol/L降至13 μmol/L，患儿尿乳清酸水平升至正常上限，这表明患儿CPS1功能已经得到部分恢复。患儿经历两次病毒感染仍保持数值稳定，无需中断蛋白质摄入。

       第三次注输后，巩固疗效，最终使血氨稳定在近正常水平。

       目前患儿的随访仅7周，还需长期监测编辑效率是否随肝细胞再生下降，以及是否需要补充剂量。另外患儿的母源突变是否会对患儿状况造成影响也值得关注。

总结

       KJ案例不仅代表了体内基因编辑技术突破，更是监管创新与多学科协作的典范。从构建替代细胞模型、优化碱基编辑器到加速审批，团队在极短时间内实现“个体化疗法从设计到临床”的全流程验证。尽管长期安全性和可推广性还需要研究（此次个体案例花费超过100万美元），此案例为罕见病基因治疗提供了可复制的范式。（  来源：生物制药小编 ）

参考来源：
doi: 10.1056/NEJMoa2504747